作为一名生物学的科研汪，想必大家都跟小编曾经一样无数次的在WB实验的诡异迷局中垂死挣扎而无法自拔；目标条带没有信号、条带呈微笑U状或者倒微笑状、背景非均一性、最边缘条带弯曲等等。可除了这些明显的问题之外，还有一个最可能会被我们忽略的问题就是内参蛋白的选择。对于很多WB实验操作者特别是WB新手来说，可能他们通常都不会在选择内参上做过多的考虑，因为从师兄师姐那里传承下来的经验可能就是内参用GAPDH、beta-Actin或alpha-Tubulin，所以在做WB实验的时候很可能就习惯性的沿用之前的经验了。可往往真相和我们所设想的就是不一样，内参蛋白的选择重要么？怎么选？下面小编就带大家一起梳理一下吧！ 首先谈谈，为什么要选择内参？     WB实验的非常重要的作用是比较不同条件下或者不同组织中，靶蛋白表达量的相对多少。但是要衡量蛋白表达水平，前提条件就是等量的上样量。由于内参蛋白在各组织和细胞中的表达相对恒定，因此可以借助检测每个样品中内参的量来判断上样量是否均等，从而进一步判断结果是否可信。 其次内参蛋白的选择应遵循的原则： （1）稳定表达：相对于总蛋白而言，内参蛋白的表达水平保持恒定 （2）分子量的大小：内参蛋白与目的蛋白的分子量大小最好相差5Kd以上。 （3）表达水平：在实验样本中内参蛋白应该是高表达的。 （4）丰度相似性：样本中内参蛋白的表达丰度应该与目的蛋白的丰度有相似性，不会出现信号饱和的现象，导致无法正确的判断出内参蛋白和目的蛋白的表达水平变化。 （5）根据实验样本的种属来源做选择。哺乳动物的组织或者细胞样本，可选择GAPDH、beta-Actin或alpha-Tubulin、Lamin B、PCNA、ATPase Na+/ K+ beta 2 (ATPB2)；植物样本可选择plant actin、Rubisco。 最后，不同实验样本该如何选择内参？     不同的组织样本在选择内参时，存在一些差别；GAPDH、beta-Actin或alpha-Tubulin作为内参并不能满足所有的WB实验。因此内参抗体的选择需要结合实际的实验条件和样本类型来确定。 细胞总蛋白 GAPDH 检测分子量大约在36kD Beta-actin 检测分子量大约在42kD Beta-tubulin 检测分子量大约在50kD Alpha-tubulin 检测分子量大约在50kD Vinculin 检测分子量大约在117kD Cyclophilin B 检测分子量大约在20kD 细胞核蛋白 PCNA 检测分子量大约在30kD Histone H3 检测分子量大约在15kD HDAC1 检测分子量大约在55kD Lamin B1 检测分子量大约在66kD TBP 检测分子量大约在35kD 植物样本 Plant Actin 检测分子量大约在42kD Rubisco 检测分子量大约在55kD 膜蛋白 ATPase Na+/ K+ beta 2 (ATPB2) 检测分子量大约在33kD 线粒体蛋白 VDAC1 检测分子量大约在32kD COX IV 检测分子量大约在17kD 全血/血浆/血清 Transferrin 检测分子量大约在77kD Albumin 检测分子量大约在66kD 产品推荐：   货号 品名 A01010 Anti-β-Actin Mouse Monoclonal Antibody (1C7) A01020 Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody (2B5) A01030 Anti-β-Tubulin Mouse Monoclonal Antibody (3G6) A01040 Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7) A01050 Anti-Plant Actin Mouse Monoclonal Antibody (3T3) A01060 Anti-COX IV Mouse Monoclonal Antibody (14Y2) A01070 Anti-Histone H3 Mouse Monoclonal Antibody (2D10) A01080 Anti-α-Tubulin Monoclonal Antibody (3G5) A01090 Anti-Lamin B1 Monoclonal Antibody (15T1) A01100 Anti-Histone H3 Monoclonal Antibody (2D9) A01110 Anti-Rubisco (Large Chain) Monoclonal Antibody (9Y6) ) A01120 Anti-TBP/TATA Binding Protein Monoclonal Antibody (2C6) A01130 Anti-Cyclophilin B Monoclonal Antibody (7B2) Abbkine专注于蛋白学和细胞学领域，致力于创新和研发各类抗体、蛋白质、分析试剂与试剂盒，以期成为生命科学研究发展、药物研发等领域的关键推动者。我们为您提供蛋白和免疫研究用户最喜爱的产品，从免疫学基础产品，如蛋白提取定量，到免疫学实验的内参标签抗体、一抗及二抗等；细胞研究用户最喜爱的产品，从用于检测细胞状态的染料及试剂盒，细胞器提取试剂盒，细胞亚结构染色示踪及细胞代谢检测产品，到用于细胞培养的细胞因子及蛋白类检测试剂盒，只为助力您的研究事业！关于Abbkine我们的定位：服务于细胞和蛋白研究全球用户，以应用流程和产品组合的方式为用户提供经济型和技术型的产品解决方案。我们的使命：激发我们内在的创造力，提供有竞争力的生物医学产品和服务，持续为客户创造最大价值。价值观：激情、敬业、学习、创新、合作、卓越  联系我们

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